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冰凍切片-20可以保存多久

中醫(yī)養(yǎng)生編輯 醫(yī)普小能手
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冰凍切片在-20℃條件下保存時(shí)間受樣本類型、保存方式等因素影響,通常可保存1-3個(gè)月。

1、樣本類型影響:

組織樣本中脂肪含量較高的腦、乳腺等標(biāo)本在-20℃保存時(shí)易發(fā)生脂質(zhì)氧化,建議1個(gè)月內(nèi)使用;肌肉、肝臟等低脂組織可保存2-3個(gè)月。RNA易降解的樣本需添加RNA穩(wěn)定劑,最長保存期縮短至2周。

2、密封處理方式:

真空密封的切片保存期可達(dá)3個(gè)月,普通密封袋保存建議不超過2個(gè)月。使用防凍管裝載切片時(shí)需確保管內(nèi)無氣泡,密封不良的樣本易產(chǎn)生冰晶損傷,保存期限減半。

3、溫度波動(dòng)控制:

頻繁開關(guān)冰箱導(dǎo)致溫度波動(dòng)會(huì)加速樣本劣化,日均開門超過3次的冰箱內(nèi)切片保存期縮短30%。建議單獨(dú)配備備用冰箱,溫度記錄儀顯示波動(dòng)超過±5℃時(shí)需提前使用樣本。

4、凍存保護(hù)劑使用:

添加10%二甲基亞砜DMSO的切片可延長保存期至3個(gè)月,甘油保護(hù)劑適用于免疫組化樣本但會(huì)干擾質(zhì)譜檢測。商業(yè)凍存液如CryoStor系列可使某些組織保存期延長20%。

5、復(fù)溫操作規(guī)范:

反復(fù)凍融會(huì)顯著降低保存期限,每增加1次凍融循環(huán)保存期縮短7天。建議分裝為單次用量,37℃水浴復(fù)溫需控制在3分鐘內(nèi),室溫自然解凍會(huì)導(dǎo)致蛋白變性。

日常保存需定期檢查冰箱運(yùn)行狀態(tài),每月清理霜凍。配套使用-80℃超低溫冰箱可延長保存期至6個(gè)月,重要樣本建議備份存儲。操作時(shí)佩戴防凍手套避免直接接觸冷凍切片,轉(zhuǎn)運(yùn)過程使用干冰維持低溫。飲食方面多攝入維生素E可減緩凍存組織氧化,適度運(yùn)動(dòng)增強(qiáng)操作者抗寒能力。

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